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G蛋白激活成Gα·GTP,每一个激素-受体复合物可激活100个三聚体G蛋白,故产生放大效应、Gα·GTP变构激活腺苷酸环化酶、腺苷酸环化酶催化ATP合成第二信使 cAMP,使细胞内cAMP浓度在几秒内升高数倍、cAMP激活蛋白激酶A

3. 特导效应:短期效应(核外效应)、长期效应(核内效应)

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4. 放大效应发生在受体、腺苷酸环化酶、蛋白激酶A及其他化学修饰环节。

1在肝细胞内激活糖原磷酸化酶b激酶,促进肝糖原分解,补充血糖。 5. 特异性:○

2在脂肪细胞内激活激素敏感性脂肪酶,促进脂肪动员。 ○

3在心肌细胞内磷酸化细胞膜电压门控钙通道,增加Ca2+内向铜梁,增强心肌收缩。 ○

4在胃黏膜壁细胞促进微管泡转运,补充顶端膜H+,K+-ATPase,促进胃酸分泌。 ○

5在海马锥体细胞抑制Ca2+ ○

第七章 核酸提取与测序

DNA测序的链终止法(建立)含DNA聚合酶、dNTP,可以用待测DNA作为模版,合成其互补链, 印迹杂交技术

核酸探针:形 常用核酸印迹法(DNA印迹法、RNA印迹法)

DNA印迹法步骤:样品制备、电泳分离、变性、印迹、固定、预杂交、杂交、漂洗、分析。 RNA印迹法步骤(与DNA差不多):RNA不需要酶切,变性剂处理,不能用碱变性,电泳凝胶不能加入溴化乙锭,所有操作严格防止Rnase污染。 蛋白质印迹法步骤:样品制备、电泳分离、印迹、封闭、监测分析

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第九章 生物芯片技术

基因芯片(DNA芯片、DNA微阵列、寡核苷酸微阵列):有序固定了寡核苷酸、基因组DNA或互补DNA高密度阵列的生物芯片,可用于分析基因组图谱、基因表达谱等。

蛋白质芯片(蛋白质微阵列):在几平方厘米的基片表面有序固定多达数万个蛋白质探针点,可以进行抗原-抗体相互作用、蛋白质-蛋白质相互作用等为基础的大规模分析。 第十章 聚合酶链反应技术

PCR基本原理

PCR体系组成:DNA TapDNA聚合酶)、引物、dNTP

第十一章 重组技术

重组DNA:DNA克隆所采用的技术和相关工作的统称。

DNA将某种DNA片段与DNA载体连接成重组DNA,导入细胞进行复制,DNA片段的大量拷贝。

DNA的特,水解该序列内部或附近的磷酸二酯键。

III型限制性内切酶

表达载体的特点:

第十三章 基因诊断和基因治疗

基因诊断:指直接检测基因组中致病基因或疾病相关基因的改变,或病原体基因的存在,并以此作为疾病的诊断指标。

基因治疗:指把缺陷基因的野生型拷贝导入患者细胞内,以治疗疾病。

1对所治疗的疾病已有充分认识,并且传统治疗无效或效果不佳; 基本条件:○

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2致病基因的野生型和突变型已有阐明 ○

3正常基因已经克隆,并且可以在体外操作,包括与载体重组 ○

4正常基因导入患者细胞内可以稳定存在,正常表达 ○

5正常基因的表达水平不需要严格控制,并且即使低水平表达也可治愈或改善症状 ○

6治疗方案必须经过审批 ○

癌细胞干细胞相关内容

学生

李杨

范文五:医学分子生物学

医学分子生物学重点

名词解释

1. 顺式调节:一个基因的调控区和结构基因位于同一个DNA分子中的相邻部位,这种调节方式称为顺式调节。

2. 开放阅读框架(ORF):在mRNA分子中,密码子之间没有间隔核苷酸,从起始密码子开始每三个核苷酸为一个密码子连续阅读,直至终止密码子出现,这一段核苷酸序列被称为开放阅读框架。ORF通常是从mRNA分子5’端的第一个AUG开始,每三个核苷酸为一组,决定肽链上的一个氨基酸,直至终止密码子结束。

3. RNA组学是研究各种细胞内具有重要功能的非编码小RNA的种类、结构和功能的前沿学科。

4. 基因组:细胞或生物体中,一套完整单倍体的遗传物质的总和。如真核细胞基因组包含细胞核染色体DNA及线粒体DNA,原核细胞基因组包含染色体DNA和质粒DNA.

5. 假基因:与有功能的基因同源,但不能产生有功能的基因产物的基因。

6.卫星DNA:是基因组的一种高度重复序列,其重复单位一般由2~10bp组成,成串排列,具有调节基因的复制和转录功能。 7. 半不连续复制:DNA复制时,一条链(前导链)连续合成,另一条链(随后链)不连续合成。

8. 端粒酶:是一种逆转录酶,由RNA和蛋白质组成,能以所含的RNA为模板逆转录合成真核生物染色体的端粒DNA重复序列,保证染色体复制的完整性。

9 . DNA损伤:各种内外因素所导致的DNA结构和组成的变化。

10.移码突变:在编码序列中,单个碱基、数个碱基及片段的缺失\插入可以使突变位点之后的三联体密码阅读框架发生改变,不能编码原来的蛋白质。

11.TATA盒:真核生物转录起始点上游与RNA聚合酶、基本转录因子相结合的DNA片段,含有TATA共有序列,是Ⅱ类启动子的重要组成部分,又称为Hogness盒。

12.RNA编辑:指细胞中初级转录产物hnRNA的序列改变,使C变为U或者A变为G,结果一个基因表达产生不止一种蛋白质,增加了遗传信息容量。

13.单顺反子:真核生物中一条mRNA模板只含有一个翻译起始点和一个终止点,因为只能翻译出一条多肽链,这种mRNA被称为单顺反子。

14.操纵子:原核生物绝大多数基因按照功能相关性成簇串联排列,与启动子、操纵基因等调控元件共同组成一个转录单位,实现协调表达。

15.组成性表达:某些基因产物对生命全过程都是必需的或必不可少的。这类基因在一个生物个体的几乎所有细胞中持续表达,通常称为管家基因。管家基因较少受环境因素影响,而是在个体各个生长阶段的大多数或几乎全部组织中持续表达或变化很小。区别于其它基因,这类基因的表达称组成性表达或基本的基因表达。

16.反义RNA:细菌中的某些RNA分子,含有与特定mRNA翻译起始部位互补的序列,通过与mRNA杂交阻断30S小亚基对起始密码子的识别及与SD序列的结合,抑制翻译起始。

17.RNA干涉:双链siRNA参与RNA诱导的沉默复合体(RISC)组成,与特异的靶mRNA完全互补结合,导致靶mRNA降解,阻断翻译过程。这种siRNA介导的基因表达抑制作用即为RNA干涉。

18.受体:细胞膜上或细胞内部能识别生物活性物质并与之结合,进而引起生物学效应的蛋白质或糖脂称为受体。

19.配体:能与受体呈特异结合的生物活性分子称为配体。

20.基因组文库:是指含有某种生物体全部基因片段的重组DNA克隆群体。构建基因组文库时,需要先提纯原核或真核细胞的基因组DNA,然后用机械法或酶解法将基因组DNA切割成大小不等的许多DNA片段,再将其插入到适当的克隆载体中,继而转入受体菌中进行扩增。存在于转化细菌内,由克隆载体所携带的所有基因组DNA片段的集合称基因组DNA文库,它包括了基因组全部基因信息。

21.基因克隆:是指将一个生物体的遗传信息(基因片段)通过无性繁殖转入另一个生物体内的过程,通过基因克隆可以得到一群完全相同的基因片段,由于基因的化学本质是DNA,因此也称其为DNA克隆。

1. 简要回答DNA双螺旋结构的三个要点

① DNA是反向平行的互补双链,一条链从上往下走向是5’到3’,另一条链是从下往上也是5’到3’,碱基位于双螺旋内侧,亲水

性的脱氧核糖和磷酸骨架则位于双螺旋外侧,两条链碱基之间以氢键连接,A与T配对形成2个氢键,C与G配对形成3个氢键。碱基平面与螺旋纵轴垂直。

② DNA分子的两条脱氧核苷酸链反向平行围绕同一中心轴旋转,呈右手螺旋。DNA双螺旋分子表面形成一个大沟和小沟。

③ 疏水性碱基堆积力和氢键是DNA双螺旋结构的稳定力:DNA双链结构的横向稳定依靠两条链互补碱基间的氢键维系,纵向则靠碱

基平面的堆积力维持。碱基堆积力对于双螺旋的稳定性更为重要。

2.基因的功能

1)利用四种碱基的不同排列荷载遗传信息。

2)通过复制将所有的遗传信息稳定、忠实的遗传给子代细胞。同时为了适应环境变化,生物体的遗传性和变异性同时存在。

3)作为基因表达的模板

3.简述质粒的基本特征:

1)原核细胞染色体外的共价闭合的环状DNA分子2)能够独立于细胞的染色体而进行复制,并依赖于宿主细胞3)其所带的遗传信息能够赋予宿主细胞特定的遗传性状4)在宿主菌中具有不相容性5)是DNA重组技术中所使用的主要载体

4.真核生物染色体中结构基因的特点:

1)通常为断裂基因 2)转录产物多为单顺反子3)在基因组所占比例较小

5.试述原核生物与真核生物基因组结构的不同之处:

(1)真核生物基因组的结构特点:1)转录产物多为单顺反子RNA 2)基因是不连续的,内部存在不编码蛋白质的内含子 3)存在大量的重复序列 4)编码区域所占比例较小 5)基因组远大于原核生物基因组,具有许多复制起点

(2)原核生物基因组的结构特点: 1)转录产物多为多顺反子 2)编码区域所占比例较大基因是连续的,不含内含子 3)重复序列很少4)编码区域所占比例较大5)基因组较小,只有一个复制起点

6.试述DNA复制的共同特点

① 半保留复制方式保证了遗传信息的忠实传递

② 基因组DNA都有固定的复制起始点

③ 复制子是复制基本单位

④ 双向复制形成复制泡和复制叉

⑤ 半不连续复制方式克服了DNA空间结

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构对DNA新链合成的制约

7.试述真核生物染色体DNA与原核生物染色体DNA复制的不同点:

1)复制起点 原核生物为一个,真核生物为多个2)复制叉移动速度 原核生物快,真核生物慢3)复制方向 原核生物双向,真核生物大多为双向4)RNA引物 原核生物长,真核生物短5)冈崎片段 原核生物长,真核生物短6)连续起始 原核生物可连续复制,真核生物不可以

8.DNA损伤的因素分为外源性因素和内源性因素。

外源性因素主要有物理因素、化学因素和生物因素。包括电离辐射、紫外线、碱基类似物、碱基修饰剂、某些化学染料、自由基和病毒等。

内源性因素主要有:机体代谢过程产生的有毒物质,复制过程中碱基的错配,DNA本身的热不稳定因素等

9.比较原核细胞与真核细胞基因转录方面存在的主要差异

1)真核基因转录涉及核小体结构解聚过程。2)原核转录与翻译偶联;真核转录在细胞核中进行3)原核1种RNA聚合酶(α2ββσ);真核3种RNA聚合酶(Ⅰ,Ⅱ,Ⅲ)分别负责不同基因的转录4)原核RNA聚合酶直接结合启动子,转录起始的特异性主要取决于σ因子;真核RNA聚合酶借助基础转录因子结合启动子,转录起始的特异性主要取决于特异转录因子。5)原核基因转录的产物是多顺反子RNA;真核基因转录的产物是单顺反子RNA

6)原核mRNA不需加工;真核mRNA需加帽、加尾、剪接、编辑。

10.比较原核细胞与真核细胞基因翻译方面有何不同

1)原核转录与翻译偶联;真核翻译在细胞质中进行。2)原核mRNA通过SD序列在核蛋白体上就位;真核mRNA通过5’端帽子-帽子结合蛋白复合物在核蛋白体上就位 3)原核起始tRNA携带N-甲酰蛋氨酸(识别AUG/GUG/UUG);真核起始tRNA携带蛋氨酸(识别AUG)。

4)原核核蛋白体70S(30S+50S);真核核蛋白体80S(40S+60S)。 5)原核3种起始因子(IF1、IF2和IF3);真核10余种起始因子(eIFn)。

6)原核2种延长因子(EFT和EFG);真核2种延长因子(EF1和EF2)。 7)原核3种释放因子(RF1、RF2和RF3);真核1种释放因子(eRF)。

11.简述乳糖操纵子得调节机制

1)乳糖操纵子包含3个结构基因(编码β-半乳糖苷酶、β-半乳糖通透酶和转乙酰基酶)、3个调控元件(启动子、操纵基因和CAP结合位点)和一个调节基因(编码阻遏蛋白)。 2)阻遏蛋白的负调控:无乳糖时,阻遏蛋白结合操纵基因,妨碍RNA聚合酶结合启动子,抑制结构基因转录。有乳糖时,生成别位乳糖(诱导剂)结合阻遏蛋白,不能封闭操纵基因,结构基因可以转录。 3)cAMP-CAP结合物的正调控:无葡萄糖时cAMP浓度高,形成的cAMP-CAP复合物结合于CAP结合位点,增强启动子转录活性。有葡萄糖时,cAMP浓度低,cAMP-CAP复合物形成受阻,影响转录活性 4)正、负调控机制相辅相成。cAMP-CAP复合物是转录必需的,同时阻遏蛋白进一步控制转录启动。

综上,乳糖操纵子最强的表达条件是有乳糖而无葡萄糖。

12.试述原核基因表达调控与真核基因表达调控的区别

1)相同点:转录起始是基因表达调控的关键环节

2)不同点:

①原核基因表达调控主要包括转录和翻译水平;真核基因表达调控包括染色质活化、转录、转录后加工、翻译、翻译后加工多个层

次。

②原核基因表达调控主要为负调节;真核基因表达主要为正调节。

③原核转录起不需要转录因子,RNA聚合酶直接结合启动子,由σ因子决定基因表达的特异性;

真核转录起始需要基础、特异两类转录因子,依赖DNA-蛋白质、蛋白质-蛋白质相互作用,调控转录激活。

④原核基因表达调控主要采用操纵子模型,转录出多顺反子RNA,实现协调调节;

真核基因转录为单顺反子RNA,功能相关蛋白质的协调表达机制更为复杂。

13.单跨膜受体介导的信号传导途径作用的基本模式:胞外信号分子与受体结合,第一个蛋白激酶被激活,磷酸化修饰激活蛋白激酶,蛋白激酶作用于效应分子引起生物效应

14.简述通过胞内受体传递信息的机制

1)信息分子;2)胞内受体;3)受体激活及作用;4)诱导蛋白的作用

15.简述基因克隆的基本步骤:1)目的基因的获取;2)克隆载体的选择与构建;3)外源基因与载体的连接;

4)重组DNA导入受体菌;5)重组体的筛选

论述题(答案仅参考)

1.如何利用PCR技术进行基因定向突变

将要进行定点突变的序列设计在引物上面 通过PCR扩增目的基因,连接T载体测序,确定成功突变后 在进行相关表达载体的构建

2.原核表达系统中影响外源基因表达效率的主要因素

主要影响因素有:启动子的强度、DNA转录起始序列、密码子的选择、mRNA分子的二级结构、转录的终止、质粒的拷贝数以及质粒的稳定性和寄主细胞的生理特征等

1:简述乳糖操纵子的的调节机制

(1):乳糖操纵子包含3个结构基因分别编码B-半乳糖苷酶、B-半乳糖苷通透酶和转乙酰基酶、3个调控元件,启动子、操纵基因和CAP结合位点和1个调节基因编码阻遏蛋白。(2):阻遏蛋白的负调控:没乳糖时,阻遏蛋白结合操纵基因,妨碍RNA聚合酶结合启动子,抑制结构基因转录。有乳糖时,生成别位乳糖结合阻遏蛋白,不能封闭操纵基因,结构基因可以转录。(3):cAMP-CAP复合物的正调控:无葡萄糖时cAMP浓度高,形成的cAMP-CAP复合物结合于CAP结合位点,增强启动子转录活性。(4):正、负调控机制相辅相成。cAMP-CAP复合物是转录必须的,同时阻遏蛋白进一步控制转录启动。综上,乳糖操纵子最强的表达条件是有乳糖而无葡萄糖。 2:简述顺式作用元件与反式作用因子对基因表达调控的影响。

(1):真核基因的转录激活受顺式作用元件和反式作用因子相互作用的调节。(2):顺式作用元件是指起转录调控作用的DNA 序列,包括启动子、增强子和沉默子等。(3):反式作用因子是指起转录调控作用的蛋白质,又称为转录因子,包括基础转录因子和特异转录因子。(4)

:顺式作用元件与反式作用因子之间的作用形式包括DNA-蛋白质、蛋白质-蛋白质相互作用。(5):DNA-蛋白质相互作用体现在:启动子和核心序列与基础转录因子结合,是RNA聚合酶结合所必需的;转录非核心序列与特异转录因子结合,调控的特异性表达。(6):蛋白质-蛋白质相互作用体现在:转录因子之间排列组合产生协同,竞争或者拮抗,决定基因转录的特异性。

3:G蛋白如何调控细胞膜上腺苷酸环化酶的活性

很多激素货递质的受体通过调节细胞膜上的腺苷酸环化酶(AC)活性产生效应。有两类G蛋白介导激素,受体等对AC的作用。一类是介导激活AC作用的Gs,另一类是介导抑制AC作用的Gi。

4:PCR技术

分为变性,退火,延伸3个步骤。将PCR反应体系升温至95℃左走,双链的DNA 模板就解开成两条单链,此过程为变性。然后将温度降至引物的KM值一下,3'端和5'端的引物个自与两条单链DNA模板的互补区域结合此过程为退火。当将反映体系的温度升至70℃左右时耐热的DNA聚合酶催化四种dNTP按照模板DNA的核酸序列的互补方式依次加至引物的3'端,形成新的DNA链。以此方式经过多次循环课得到大量的模板DNA拷贝。

范文六:医学分子生物学

BIOL8107 医学分子生物学

Medical Molecular Biology

开课院系:医学院 任课教师:查锡良教授等

开课学期:第二 学分:3 周学时:4 总学时:54 课程性质:博士学位基础课

适用专业:生物化学与分子生物学(医)及其他医学基础学科

本课程的教学目的

通过讲授及讨论医学分子生物学某些重要领域的新进展,使研究生了解这些领域先进的研究技术,熟悉它们的基础研究及应用研究现状。对研究生目前及将来的研究工作有直接或间接的

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指导意义。、

教学内容及基本要求

内容:1,基因结构与功能及基因组;2,基因表达调控及脂肪细胞发育;3,蛋白质结构与功能及蛋白质折叠与疾病;4,酶的催化作用和特殊生物学功能;5,细胞周期与分化;6,细胞凋亡共6个论题,每个论题均组织一次新文献讨论。

要求:熟悉分子生物学在上述领域中的新进展,探讨如何结合自身的研究工作引入新技术、新概念。

考核方式及要求

考试。

学习本课程的前期课程要求

掌握基本的生化与分子生物学知识。

教材及主要参考书目、文献与资料

查锡良教授主编《医学分子生物学》人民卫生出版社。

Robert F. 《Molecular Biology》科学出版社。

范文七:医学分子生物学

编辑

书名:医学分子生物学(供8年制及7年制临床医学等专业用全国高等学校教材)

ISBN:711706927

作者:冯作化 王广义 李伟

出版社:人民卫生出版社

定价:52

页数:418

出版日期:2005-8-1

版次:

开本:大16开

包装:平装

目录

1图书信息

2内容简介

3图书目录

4图书信息

5内容简介

6图书目录

7图书信息

简介:分子生物学是一门从分子水平研究生命现象、生命的本质、生命活动及其规律的科学。医学分子生物学是分子生物学的一个重要分支,是从分子水平研究人体在正常和疾病状态下生命活动及其规律的一门科学。它主要研究人体生物大分子和大分子体系的结构、功能、相互作用及其同疾病发生、发展的关系。作为一门课程,医学分子生物学涵盖了医学各专业学生必须学习的分子生物学基础知识,以及分子生物学在医学领域中形成的专门研究领域及相关知识。这些基础知识将为医学各学科专业知识的学习、为将来了解各学科领域的研究进展奠定坚实的基础。根据全国高等医药教材建设研究会2005年4月召开的长学制临床医学专业教材主编人会议的精神,我们编写了这本《医学分子生物学》教材。本教材适合七年制和长学制临床医学专业学生用,也可作为医学各专业研究生的选用教材。分子生物学的理论与技术已在医学领域广泛应用。学习医学分子生物学这门课程,既要较系统地了解分子生物学的基础理论知识和技术理论知识,同时也要了解分子生物学在医学领域的应用和相关研究进展。本书介绍的医学分子生物学知识包括5个方面的内容。第2章至第10章介绍与医学密切相关的分子生物学基本知识,主要介绍基因和基因组的基本概念和基本特点,基因组核酸的复制与损伤修复、基因表达和功能蛋白质的形成与降解、基因表达的调控、细胞间通讯与信号转导的基本概念和基本理论,细胞增殖与凋亡的相关分子生物学机制。第11章至第13章介绍基因操作的基本知识,主要介绍基因分析、基因功能研究和基因克隆与表达的有关基本知识和研究策略,这些知识是从事医学科学研究、掌握医学各学科研究进展、了解分子生物学在临床医学中的应用所必备的基础知识。第14章至第18章介绍疾病相关的分子生物学机制,主要介绍基因和基因组、细胞间通讯和信号转导与人类健康和疾病之间的关系。这些关系在“绪论”中也有概括的介绍。第19章至第21章介绍分子生物学理论和技术在医学中的应用,包括基因诊断和基因治疗的基本概念与相关研究、药物相关的分子生物学研究等内容。最后两章介绍分子生物学的新兴研究领域、生物信息学在基因和蛋白质研究中的应用。这都是近年迅速发展的科学研究领域,内容极其丰富,但由于篇幅有限,在本教材中只安排了两章,对这些内容进行概括的介绍,如果对其有兴趣,可在今后进行相关研究时继续获取相关的丰富知识。医学分子生物学内容十分丰富,由于篇幅所限,本教材中并未涵盖医学分子生物学的全部内容。人民卫生出版社出版的五年制临床医学专业规划教材《医学分子生物学》和研究生规划教材《医学分子生物学》是本教材的姊妹篇,这三本教材所包含的医学分子生物学内容各有侧重,有兴趣较全面地了解和掌握医学分子生物学的本科生、研究生、临床医师和从事有关研究的医学各学科领域的科研人员,可以这三本教材互为参考,综合阅读,相信对较全面地掌握医学分子生物学理论知识一定有所帮助。

目录:

第一章 绪论

第一节 分子生物学是从分子水平探讨生命活动的本质

第二节 医学分子生物学主要是在分子生物学水平进行疾病相关研究

第二章 基因

第一节 基因是遗传的基本单位

第二节 遗传信息按照中心法则有序传递

第三节 基因(符号)的命名法)

第三章 基因组

第一节 基因组是一套完整单倍体的遗传物质的总和

第二节 不同病毒基因组的核酸具有不同特点

第三节 原核生物基因组比较简单

第四节 真核生物基因组更加复杂

第五节 基因组变异具有重要的生理和病理意义

第六节 基因组学是20世纪末发展起来的一门科学

第四章 基因组核酸的复制

第一节 各种基因组核酸的复制具有共同机制和不同特点

第二节 原核生物基因组DNA可以不同的模式复制

第三节 真核生物基因组DNA的复制具有原核生物基因组DNA复制不同的特点

第四节 不同病毒的基因组核酸以不同模式进行复制

第五章 DNA损伤与修复

第一节 多种因素可引起DNA损伤并具有各自的机制

第二节 DNA损伤修复机制是遗传保守性的重要保障

第三节 生物标记物可作为DNA损伤和修复的参考标志

第四节 DNA损伤和修复具有重要的生物学意义

第六章 基因的表达

第一节 原核生物基因的转录和翻译是偶联进行的基因表达过程

第二节 真核生物基因的表达

第七章 翻译后功能蛋白质的形成和降解

第一节 新生肽链经折叠形成特定空间构象

第二节 寡聚蛋白需要一个组装过程

第三节 蛋白质翻译后需进行不同形式的共价修饰

第四节 翻译后蛋白质通过靶向运输到特定部位才能发挥特定的生物学功能

第五节 蛋白质分子在细胞内由蛋白酶体降解

第八章 基因表达的调控

第一节 原核生物基因表达的调控主要在转录和翻译两个水平

第二节 真核生物基因表达的调控是多级调控

第三节 基因表达的“统一理论”

第九章 细胞间通讯与信号转导

第一节 细胞通讯

第二节 细胞信号转导机制概述

第三节 脂溶性化学信号的受体是位于细胞核内的转录因子

……

第十章 细胞增生和凋亡的分子机制

第十一章 基因分析的基本策略

第十二章 基因功能分析的基本策略

第十三章 基因工程与基因体外表达

第十四章 基因结构和表达变化与疾病的关系

第十五章 可遗传的基因组变异与人类疾病易感生

第十六章 感染性疾病相关基因

第十七章 信号转导异常与细胞增生和凋亡相关疾病

第十八章 细胞间通讯与T细胞应答调控

第十九章 在基因水平诊断疾病

第二十章 基因治疗研究

第二十一章 药物相关的分子生物学研究

第二十二章 分子生物学的新兴研究领域

第二十三章 生物信息学在基因和蛋白质研究中的应用

中英索引

英中索引

1图书信息编辑

书 名: 医学

分子生物学

作 者:胡维新

出版社: 科学出版社

出版时间: 2010年4月29日

ISBN: 9787030184849

开本: 16开

定价: 45.00元

2内容简介编辑

全书共有十六章,第一章简要介绍了分子生物学的研究对象、发展历史以及与医学的关系;第二章至第六章为分子生物学基本理论和基础知识部分;第七章至第十一章介绍分子生物学研究技术、原理及其应用;第十二章至第十六章讨论疾病产生的分子基础和分子生物学在医学领域中的应用。本书不仅可以作为相关专业本科生、研究生的教材,也可作为医学、生命科学领域从事教学、科研的教师以及医务工作者的参考用书。

3图书目录编辑

前言

第一章 绪论

第一节 分子生物学的研究对象

第二节 分子生物学发展简史

第三节 分子生物学与相关学科的关系

第四节 分子生物学与医学未来

参考文献

第二章 基因与基因组

第一节 基因

第二节 基因组

参考文献

第三章 遗传信息的复制与表达

第一节 中心法则

第二节 DNA的生物合成(复制)

第三节 RNA的生物合成(转录)

第四节 蛋白质的生物合成

参考文献

第四章 蛋白质的加工、运输与降解

第一节 新生肽链的折叠

第二节 蛋白质亚基的聚合与组装

第三节 蛋白质翻译后的修饰

第四节 蛋白质的运输和定位

第五节 细胞内蛋白质的降解

参考文献

第五章 基因表达的调控

第一节 原核生物基因表达的调控

第二节 真核生物基因表达的调控

第三节 基因表达的调控网络与协同控制

参考文献

第六章 DNA损伤与修复

第一节 DNA损伤的原因及后果

第二节 DNA修复

参考文献

第七章 基因结构与表达分析的基本策略

第一节 DNA序列分析

第二节 核酸分子杂交

第三节 聚合酶链反应

第四节 基因芯片和微阵列技术

第五节 Western免疫印迹技术

第六节 基因结构与表达分析的其他技术

参考文献

第八章 基因工程与体外表达

第九章 蛋白质组学的研究方法和进展

第十章 基因转移技术和基因打靶技术

第十一章 疾病产生的分子基础

第十二章 基因诊断

第十三章 基因治疗原理与研究进展

第十四章 免疫分子生物学

第十五章 肿瘤分子生物学

索引

4图书信息编辑

书 名: 医学分

子生物学

作 者:胡维新

出版社: 科学出版社

出版时间: 2010年4月29日

ISBN: 9787030184849

开本: 16开

定价: 45.00元

5内容简介编辑

全书共有十六章,第一章简要介绍了分子生物学的研究对象、发展历史以及与医学的关系;第二章至第六章为分子生物学基本理论和基础知识部分;第七章至第十一章介绍分子生物学研究技术、原理及其应用;第十二章至第十六章讨论疾病产生的分子基础和分子生物学在医学领域中的应用。本书不仅可以作为相关专业本科生、研究生的教材,也可作为医学、生命科学领域从事教学、科研的教师以及医务工作者的参考用书。

6图书目录编辑

前言

第一章 绪论

第一节 分子生物学的研究对象

第二节 分子生物学发展简史

第三节 分子生物学与相关学科的关系

第四节 分子生物学与医学未来

参考文献

第二章 基因与基因组

第一节 基因

第二节 基因组

参考文献

第三章 遗传信息的复制与

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表达

第一节 中心法则

第二节 DNA的生物合成(复制)

第三节 RNA的生物合成(转录)

第四节 蛋白质的生物合成

参考文献

第四章 蛋白质的加工、运输与降解

第一节 新生肽链的折叠

第二节 蛋白质亚基的聚合与组装

第三节 蛋白质翻译后的修饰

第四节 蛋白质的运输和定位

第五节 细胞内蛋白质的降解

参考文献

第五章 基因表达的调控

第一节 原核生物基因表达的调控

第二节 真核生物基因表达的调控

第三节 基因表达的调控网络与协同控制

参考文献

第六章 DNA损伤与修复

第一节 DNA损伤的原因及后果

第二节 DNA修复

参考文献

第七章 基因结构与表达分析的基本策略

第一节 DNA序列分析

第二节 核酸分子杂交

第三节 聚合酶链反应

第四节 基因芯片和微阵列技术

第五节 Western免疫印迹技术

第六节 基因结构与表达分析的其他技术

参考文献

第八章 基因工程与体外表达

第九章 蛋白质组学的研究方法和进展

第十章 基因转移技术和基因打靶技术

第十一章 疾病产生的分子基础

第十二章 基因诊断

第十三章 基因治疗原理与研究进展

第十四章 免疫分子生物学

第十五章 肿瘤分子生物学

索引

7图书信息编辑

书名:医学分子生物学

ISBN:703007357

作者:曾建飞/姚坚毅

出版社:科学出版社

定价:29

页数:283

出版日期:1999-6-1

版次:1

开本:16开

包装:平装

简介:21世纪是“生命科学世纪”,分子生物学是生命科学的带头学科。本书从分子生物学基本原理、分子生物学实验技术以及分子生物学在医学中的应用三个部分对现代分子生物学进行了论述。作者根据医学院校的培养目标,自始至终坚持理论联系实际的原则,突出了本书基础理论与临床实践相结合的特点。

本书为医学院校各专业本科生、研究生的分子生物学教材,也可作为临床医师再教育的教材。

目录:

第一章 染色体和基因

第一节 基因的概念

一、基因的生物学定义

二、基因的分子生物学定义

三、细胞基因组

第二节 原核生物与真核生物

一、生物种类

二、原核细胞和真核细胞内核酸含量、种类和功能的差异

第三节 病毒基因组

第四节 细菌基因组

一、细菌染色体基因组的结构特点

二、大肠杆菌

三、质粒

第五节 真核生物基因及特点

一、真核生物基因组的一般特点

二、真核生物基因组的C值矛盾

三、真核生物DNA序列的类型

四、多基因家族

五、DNA指纹技术

第六节 染色质的结构

一、染色质的主要成分

二、核小体是染色质的基本结构单位

第七节 染色体形态、功能研究中所用术语与新技术简介

小结

第二章 细胞周期和细胞凋亡

第一节 细胞周期

一、细胞周期

二、细胞周期的控制点

第二节 细胞周期的调控

一、细胞因子与相应的受体

二、周期素与周期素依赖性激酶对细胞周期的调控

三、参与细胞周期调控的原癌基因及抑癌基因

四、cAMP与cGMP在细胞周期中的变化

第三节 细胞凋亡

一、细胞凋亡

二、细胞凋亡的基因调控

小结

第三章 重组DNA技术概述

第一节 分子生物学简史及重组DNA技术的诞生

一、重组DNA技术诞生的理论基础

二、关键性实验技术问世为重组DNA技术奠基

第二节 重组DNA技术的定义及步骤

一、重组DNA技术定义

二、重组DNA技术的重大意义

三、重组DNA技术的基本步骤

第三节 重要的工具酶

一、限制性核酸内切酶

二、DNA聚合酶

三、DNA连接酶

四、T4多核苷酸激酶

五、碱性磷酸酶

小结

第四章 获得目的基因

第一节 获得目的基因的原理方法

一、构建cDNA文库筛选目的基因

二、构建真核细胞基因组文库筛选目的基因

三、人工合成目的基因DNA片段

四、聚合酶链反应合成DNA

五、其他方法

第二节 获得目的基因方法的选择原则

一、根据获得目的基因的目的选择方法

二、根据目的基因本身特点选择方法

三、根据实验室设备条件选择方法

第三节 目的基因序列测定

一、目的基因序列测定的意义

二、目的基因测序方法

三、长链DNA测序的策略

小结

第五章 重组体的构成、导入和筛选

第一节 基因克隆的载体

一、质粒载体

二、噬菌体载体

第二节 目的基因与载体的连接

一、连接的策略

二、连接反应的建立

第三节 重组子导入受体菌

一、氯化钙法

二、电穿孔法

第四节 重组子的筛选与鉴定

一、插入片段长度鉴定

二、插入片段方向性鉴定

小结

第六章 重组体在宿主细胞中表达与调控

第一节 基因表达概述

一、基因表达的概念

二、基因表达的基本条件

第二节 重组体在原核细胞中的表达

一、原核生物基因表达的特点

二、外源基因在原核细胞中表达的重要调控元件

三、原核细胞表达载体简介

四、对外源目的基因的要求

第三节 重组体在真核细胞中表达的策略

一、哺乳动物细胞表达的优点及载体种类

二、真核细胞表达元件

三、哺乳动物基因转移的遗传选择性标记

四、表位标记

五、基因表达产物的检测——Western印迹法

第四节 表达产物的分离与纯化

一、包涵体中重组蛋白质的分离与纯化

二、蛋白质纯化技术

小结

第七章 核酸的杂交

第一节 核酸杂交的基本原理

一、核酸变性

二、核酸的复性

三、核酸杂交概念

第二节 核酸探针

一、探针的概念

二、探针种类和选择

三、探针标记原理

第三节 核酸分子杂交技术

一、液相分子杂交

二、固相分子杂交

小结

第八章 聚合酶链式反应

第一节 PCR基本原理和影响因素

一、基本原理

二、参与PCR反应体系的因素及其作用

第二节 常用的几种PCR反应

一、反转录PCR

二、定量PCR

三、碱基替代PCR

四、彩色PCR

五、重组PCR

六、不对称PCR

七、膜结合PCR

八、固着PCR

九、原位PCR

十、反向PCR

第三节 PCR在分子生物学中的应用

一、用PCR制备cDNA文库与筛选

二、PCR直接测序法

三、PCR用于染色体区带特异片段克隆

四、检测突变碱基

五、用简并引物法扩增未知序列

六、用PCR标记DNA探针

七、PCR与新基因的寻找

第四节 PCR在临床医学中的应用

一、病原体检查

二、遗传病的基因诊断

三、肿瘤的诊断、转移确定

四、PCR用于组织器官移植的配型选择

小结

第九章 分子免疫学

第一节 免疫球蛋白

一、免疫球蛋白分子基本结构

二、免疫球蛋白基因的染色体定位

三、免疫球蛋白基因结构的重排

四、抗体多样性的形成

第二节 T细胞抗原受体

一、T细胞抗原受体结构

二、T细胞抗原受体基因结构和重排

第三节 主要组织相容性复合体

一、MHC分子结构

二、MHC基因结构

三、MHC基因的生物学功能

四、MHC分子参与对抗原的处理和识别

第四节 细胞因子

一、细胞因子的共同特征

二、细胞因子的功能

三、细胞因子及其受体结构特点

四、细胞因子基因

小结

第十章 神经营养因子

第一节 神经营养因子总论

一、神经营养因子的种类

二、细胞因子的功能特点

第二节 神经生长因子各论

一、神经营养因子

二、白细胞介素6

第三节 神经营养因子与疾病

一、细胞因子与神经再生

二、神经营养因子与受体

三、老年性痴呆

小结

第十一章 癌基因和肿瘤抑制基因

第一节 肿瘤细胞的特征

一、肿瘤是一种基因的疾病

二、肿瘤细胞在体外培养中的特征

第二节 肿瘤病毒和癌基因

一、DNA肿瘤病毒和癌基因

二、反转录病毒和癌基因

第三节 肿瘤抑制基因

一、肿瘤抑制基因存在的证据

二、RB基因——控制细胞周期的肿瘤抑制基因

三、p53基因——“基因组的保护神”

第四节 肿瘤形成的多步骤学说

一、多步骤学说的实验证据

二、人类直肠癌和多步骤致癌说

小结

第十二章 基因诊断和基因治疗

第一节 基因诊断

一、基因诊断的定义、原理

二、基因诊断的途径

三、基因诊断的技术和方法

四、分子探针

五、基因诊断在感染性疾病、遗传病和肿瘤中的应用

第二节 基因治疗的基本概念和策略

一、基因治疗的概念

二、基因治疗的策略

第三节 基因治疗的条件

一、目的基因的获得

二、靶细胞的选择

三、基因转移的方法

小结

第十三章 DNA重组技术在医学和制药工业中的应用

第一节 DNA重组技术的应用

一、重组蛋白质的表达系统

二、利用细菌作为表达系统

三、利用酵母细胞作为表达系统

四、利用哺乳动物细胞作为表达系统

第二节 蛋白质工程

一、抗体工程

二、蛋白质工程的其他应用

三、噬菌体展示法

第三节 转基因动物和“动物药厂”

一、转基因动物

二、“动物药厂”

三、抗感染动物

第四节 动物克隆

小结

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范文八:医学分子生物学重点

第一章 基因表达调控

第一节 基因表达调控概念、方式、调控的主要阶段(转录)

管家基因、奢侈基因概念

第二节 原核生物基因表达调控

1、 转录起始调控

2、 乳糖操纵子及调节(重点介绍)

3、 色氨酸操纵子

4、 原核生物的转录后调控(主要讲要点,不是重点)

第三节 原核与真核基因的差别

1、 真核生物基因表达调控特点

2、 染色质结构与基因表达(不讲)

3、 DNA甲基化与基因活性的调控

请结合医学病例讲解甲基化对基因的影响

4、 转录水平的调控

顺势作用元件

反式作用因子

蛋白质之间相互作用部分(不是重点)

酵母双杂交技术

5、 翻译水平的调控

第二章 细胞增值、分化与细胞凋亡的分子

第一节 细胞增殖

1、 细胞周期

介绍细胞周期分期、周期蛋白、重点介绍细胞周期调节方式

原癌期和抑癌期的概念

2、 细胞周期的调控

介绍Rb和P53为主的调节方式

第二节 细胞分化

1、 细胞分化

2、 细胞分化的基因调控机制

3、 干细胞分化

第三节 细胞凋亡

1、 细胞凋亡

2、 细胞凋亡的信号转导途径

第三章 基因工程

第一节 概念

1、 基因工程的基本概念(基因工程定义)

2、 基因工程的发展历史(自学)

3、 基因工程的应用(简介)

第二节 基因工程中常用的工具酶

1、 限制性核酸内切酶

2、 DNA连接酶

3、 其他用于DNA重组的工具酶

第三节 基因工程中的载体 质粒作为载体的3个条件

1、 质粒载体一般的生物学特征

2、 PBR322和PUC,多克隆位点、抗性等

第四章 目的基因的获取

第四节 重组体的构建、导入与筛选

基因工程六个基本步骤(大题)

1、 DNA的连接

2、 重组体的导入

3、 重组体克隆的筛选与鉴定

第五章 分子杂交

第一节 分子杂交概论

1、 分子杂交技术的发展简史及展望

2、 分子杂交的基本原理

3、 分子杂交的基本方法

4、 分子杂交的基本类型

第二节 southern 印记杂交

1、 实验原理

2、 实验方法

3、 实验结果

4、 注意事项

第三节 northern 印记杂交

1、 实验原理

2、 实验方法

第四节 western 印记杂交

1、 蛋白质样品的制备

2、 蛋白质样品的定量

3、 蛋白质样品的分离

4、 蛋白质样品的转移

5、 蛋白质样品的检测

6、 注意事项

第六章 基因诊断与基因治疗

(课本上的黑体字部分注重看,了解方法步骤)

名词解释(5×3′)

填空题(15×1′)

判断题(10×1′)

单选题(30×1′)

问答题(3×10′)

1、 绝缘子

2、 启动子

3、 反式作用因子

4、 细胞增殖

5、 基因工程

6、 细胞凋亡

7、 基因表达

8、 cDNA

9、 基因诊断

10、 Southern blotting

11、 顺式作用元件

12、 Plasmid

1、 为什么在PCR反应过程中,使用三个不同的温度不变?

高温变性、低温退火、中温延伸3个阶段。

1. 变性:加热使模板DNA在高温下(94-95℃)变性,双链间

范文九九网
的氢键断裂而形成两条单链,即变性阶段。

2. 退火:在体系温度降至37-65℃,模板DNA与引物按碱基配对原则互补结合,使引物与模板链3’端结合,形成部分双链DNA,即退火阶段。

3. 延伸:体系反应温度升至中温72℃,耐热DNA聚合酶以单链DNA为模板,在引物的引导下,利用反应混合物中的4种脱氧核苷三磷酸(dNTP),按5’到3’方向复制出互补DNA,即引物的延伸阶段。

2、 常用的基因载体有哪些,请举例说明。

1、 质粒,能自主复制,可含有抗性基因、β-半乳糖苷酶基因;

2、 λ噬菌体,显性双链,两端有粘性末端,裂解生长,可包装成颗粒释出,与溶源生

长有关的较大区域可被外源DNA取代。

3、 单链丝状噬菌体,为单链环状DNA,侵犯宿主菌后借助宿主的酶系统把单链DNA

复制为双链DNA,双链DNA称为复制型,在宿主细胞内扩增达一定数量,可由外壳蛋白包装成丝状,分泌到基质,特点,便于测序;

4、 动物病毒,可被导入真核细胞,混合型病毒即可转染原核细胞,又可转染真核细胞;

5、 黏粒,即柯斯质粒,是cos序列与质粒载体的结合产物,介于噬菌体和质粒之间的

杂交体,兼有两者之优点,可克隆较大DNA片段;

6、 酵母人工染色体,具有真核生物染色体特点,可克隆很大外源片段和表达真核生物

基因。

3、 叙述乳糖(lac)操纵子的组成,功能及其调控机制。

4、 简述乳糖操纵子的正负调控机制

1、 乳糖操纵子包含3个结构基因(编码β—半乳糖苷酶、β—半乳糖苷通透酶和

转乙酰基酶)、3个调控元件(启动子、操控基因和CAP结合位点)和1个调节

基因(编码阻遏蛋白)

2、 阻遏蛋白的负调控:无乳糖时,阻遏蛋白结合操纵子基因,妨碍RNA聚合酶结

合启动子,抑制结构基因转录。有乳糖时,生成别位乳糖(诱导剂)结合蛋白,

不能封闭操纵基因,结构基因可以转录。

3、 Camp-CAP复合物的正调控:无葡萄糖时,cAMP浓度高,形成的Camp-CAP复

合物结合于CAP结合位点,增强启动子转录活性。有葡萄糖时,cAMP浓度低,

cAMP-CAP复合物形成受阻,影响转录活性。

4、 正、负调控机制相辅相成。cAMP-CAP复合物是转录必须的,同时阻遏蛋白进

一步控制转录启动。综上,乳糖操纵子最强的表达条件是乳糖而无葡萄糖。

5、 试述southern 印记杂交的基本步骤

(1)待测核酸样品的制备:抽取纯化基因组DNA ,用DNA限制酶将其切割成大小不同的DNA片段,可用一种限制酶消化,也可用两种限制酶进行消化。

(2)待测DNA样品的电泳分离:将待测DNA样品加入到琼脂糖的凝胶孔中,在适当的缓冲液中,DNA带负电荷,在电场中即向正极移动。由于琼脂糖形成网状物质,具有分子筛作用。因而分子越大,泳动速度越慢,分子越小,泳动速度越快。大小相同的分子泳动速度相同。经电泳后,处于同一条带,大小不同的分子经电泳后就形成许多带。

(3)凝胶中核酸的变性(碱变性):转膜前对凝胶中的DNA进行碱变性及中和处理,

(4)Southern印迹:Southern印迹是指将电泳分离的DNA片段转移到一定的固相支持物上的过程。Southern印迹的常用方法有毛细管虹吸印迹法、电转法、真空转移法。通常将DNA分子转移至NC膜上,与溶液中的探针进行杂交反应。

(5)制备探针:探针可以是纯化的DNA片段或寡核苷酸片段。

(6)Southern杂交,包括预杂交和杂交。预杂交的目的是将膜上所有能与DNA结合的位点封闭,预杂交液是不含有DNA探针的杂交液。预杂交后加入DNA探针后即成为杂交液,与膜上的待测DNA进行杂交。

(7)杂交结果的检测:所用探针是用放射性核素标记的则通过放射自显影检测;所用探针是用生物素或地高辛标记的则通过比色或化学发光检测。

6、 简述基因工程的基本过程

(1) 从基因组中,经过酶团消化或PCR扩增等不步骤,分离出带有目的基因的DNA

片段

(2) 对目的基因和载体进行切割便于二者连接

(3) 在体外,将带有目的基因的外源DNA片段连接到能过自我复制的并具 有选择记

号的载体分子上,形成重组DNA分子

(4) 将重组DNA分子转移到适当的受体细胞,并与之一起增值。

(5) 从大量的细胞繁殖群体中筛选和鉴定转化细胞,获得外源基因高效稳定表达的

重组DNA分子受体细胞克隆

从这些筛选出来的受体细胞克隆,提取出已经得到扩增的目的基因,供进一步分子研究使用。

范文九:医学分子生物学样卷

医学分子生物学样卷 名词解释

1、DNA 的态性 DNA多态性是指染色体DNA等位基因中核苷酸排列的差异性。

2、genome 包含一个细胞或生物体的全套遗传信息的基因。

3、基因芯片技术 将大量的核酸片段固定在硅片、玻片、塑料片上,并以此为基因探针与标记的样品中待检测的靶基因片段杂交,通过检测杂交信号的强度与分布进行分析,从而实现对靶基因的存在、含量及变异信息的快速检测。包括四个主要步骤:芯片制备、样品制备、杂交反应和信号检测和结果分析。

4、探针 是标记过的一小段DNA或RNA,用来检测与其互补的核酸序列。

5、DNA印迹技术 southern blotting 讲电泳分离后的DNA片段在凝胶中进行变性使其成为单链,然后将一张硝酸纤维素膜(NC)放在凝胶上,上面放上吸水纸巾,利用毛细管作用原理使凝胶上的DNA片段转移到NC膜上,使之成为固相化分子。载有DNA单链分子的NC膜就可以在杂交液中与另一种带有标记的DNA或RNA分子(探针)进行杂交,具有互补序列的DNA或RNA结合到存在于NC膜的DNA分子上,经放射自显影或其他技术就可以显现出杂交分子的区带。

6,、基因敲除 knock-out 通过一定的途径使机体特定的基因失活或缺失的技术。通常意义上的基因敲除主要是应用DNA同源重组原理,用设计的同源片段替代靶基因片段,从而达到基因敲除的目的。

问答题

1、试述真核基因组的基本特点。

基因组远大于原核生物的基因组,具有多个复制起始点,而每个复制子的长度较小; 真核生物基因组DNA与组蛋白等构成染色质,被包裹在核膜内;

真核生物基本上不存在操纵子结构,一个结构基因转录成一条mRNA, 即mRNA是单顺反子;

非编码区存在大量重复序列;

基因组中非编码区多余编码区。

2、基因治疗的基本策略与基本程序。

基因治疗是用具有正常功能的基因去置换或增补患者体内有缺陷的基

因,从而达到治疗疾病的目的。基本策略包括基因矫

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正、基因置换、基因修复、基因修饰; 基因失活、免疫调节、耐药基因治疗。基本程序有:治疗性基因的获得、基因载体的选择、治疗基因导入靶细胞。

3、PCR技术的基本原理是什么?荧光定量与普通PCR技术相比的优缺点有哪些? PCR的基本原理是以拟扩增的DNA分子为模板,以一对分别与模板末端相互补的寡核苷酸片段为引物,在DNA聚合酶的作用下,按照半保留复制的机制沿着模板链延伸直至完成新的DNA合成,不断重复这一过程,即可使目的DNA片段得到扩增。基本步骤包括变性-退火-延伸;

荧光定量体现可以看到整个扩增过程,可以看到扩增效率,溶解温度,直接得到的标准曲线等,这些是普通pcr无法实现的

荧光定量对扩增片段有较高的要求

荧光定量可以实现精确定量,普通pcr则不行

荧光定量可以不进行电泳就对产物进行定量分析,普通pcr必须电泳

4、简述DNA分子克隆的基本步骤。

基本步骤包括:制备目的基因→目的基因与载体合成成DNA重组→导入宿主细胞→筛选、鉴定→扩增和表达。

5、简述利用sanger法进行DNA序列测定的基本原理和过程。

原理:实验分为四组进行,每一组内除有四种正常的dNTP外,还需加入一种ddNTP。引物的末端有放射性同位素标记,当引物与模板退火时,正常的dNTP与ddNTP竞争性地与模板结合,如果模板链结合上去的是一个ddNTP,此时引物延伸将停止于ddNTP处,通过电泳可将相差只有一个碱基的扩增产物分开,此后转印,放显,读序;

过程:.变性双链模板的制备 延伸和终止反应 测序反应物电泳和序列读取。

6、试述基因工程实验条件中各种常用工具酶的名称及应用。

限制性内切酶

T4 DNA连接酶

逆转录酶

识别和切割双链DNA分子内特定核苷酸序列。 Ⅰ型 兼具甲基化修饰和ATP参与的核酸内切酶活性,随机切割。 Ⅱ型 大多能特异识别4~6个核苷酸序列(回文结构),最大识别序8 个核苷酸 Ⅲ型:功能基本同Ⅰ型,但为特定位点切割。 能催化两个DNA片段的3′-OH和5′-磷酸形成3′,5′-磷酸二酯键,将两个 片段连接成为一个共价结合的DNA分子。 RDDP 以mRNA为模板合成cDNA, 外切酶活性, 依赖DNA 的DNA聚合酶 以DNA为模板合成dsDNA

范文十:医学分子生物学复习题

分子生物学复习题

一、名词解释

1、Northern Blot P40第九

2、motif P12第七

3、open reading frame,ORF P25第八

4、secondary massager

5、receptor P73第一

6、probe

7、vector P39第三

8、Gene therapy P44第五

9、癌基因 P94第二

10、Transgenic animal

11、不对称PCR

12、多重PCR

13、蛋白质变性

14、Enhancer P32第三

15、cis-acting elements

16、molecular chaperone

17、G protein P69第八

18、基因文库 P40第六

19、α-互补 P40第七

20、融合蛋白

21、DNA芯片(DNA chips)P6第14

22、Anti-oncogene P94第三

23、RFLP P5第四

24、gene superfamily P5第二

25、insertion sequence

26、trans-acting factor P31第六

27、housekeeping gene P31第四

28、转座子(transposon)

29、Klenow片断

30、Structural domain P12第13

31、S-D序列 P25第10

32、cDNA文库 P40第五

33、Gene targeting

34、Gene diagnosis P44第一

35、自杀基因

36、不对称转录

37、酶活性中心P64第二

38、信号分子

39、housekeeping gene P3

范文九九网
1第四

40、限制性核酸内切酶 P39第二

41、operon P31第二

42、显微注射

43、多克隆位点(MCS)

44、gene diagnosis P44第一

45、单核苷酸多态性(SNPs) P6第13

46. gene interference P44第八

47. 抗体酶

48. 阮病毒

49. HRE P74第十题

50. Caspase P85第七

二、问答题

1、真核基因组的结构特点有哪些?

2、何谓基因克隆?简述重组DNA技术的基本原理过程。

3.简述原癌基因激活的机制。P94第七题

4. 简述Southern 杂交的基本过程。P40第八题

5、比较真核生物与原核生物转录过程的异同

6、以乳糖操纵子为例,说明原核基因表达调控的机制 第32页论述第二题

7、何谓载体?表达载体应具备哪些条件?第40页问答第二题

8、简述转基因动物的基本方法。

9、简述sanger 双脱氧链终止法测序的原理第40页问答第七题

10、简述PCR的基本原理

11、简述信号分子(配体)与受体作用的特点。P74简答第三题

12、试述PCR体系的基本成分及基本反应步骤 P40页问答第五题

13、试述参与原核生物DNA复制的酶类及其作用P21页论述第一题自己总结

14. 简述基因敲除的基本过程。

15、简述原核生物与真核生物基因组结构和功能的异同

17、何谓细胞凋亡?简述细胞凋亡的生物化学特点。P85第一题

18、从基因水平上,怎样进行亲子鉴定和个体识别?P45第八题

19、比较DNA 与RNA 的异同点。(生化复习范围有这个,没考)P12论述第一题

20、DNA复制的保真性如何?哪些因素保证此保真性? (生物化学今年考的这个题)P19论述

21、一个蛋白质分子进入线粒体基质的一般性模型大约包括以下步骤?P59简答第七题

22、试述真核生物hnRNA的加工过程。(生物化学复习范围有这个,没考)P25简答第二题

23、真核细胞成熟mRNA的结构特点有哪些?(生物化学今年考的这个题,仅作参考)

24、简述肿瘤基因治疗的策略。P45问答第五题

25、体内有哪些激素的第二信使?它们各自是如何生成?其作用是什么?